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豬流感病毒H1亞型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒

采用間接ELISA方法檢測(cè)血清中豬流感病毒H1N1的抗體。
本試劑盒敏感性達(dá)92%，比常規(guī)的血凝抑制試驗(yàn)敏感性高10倍；特異性為100%。
具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)，是國(guó)家*的ELISA抗體檢測(cè)試劑盒
價(jià)格遠(yuǎn)低于國(guó)外同類產(chǎn)品，具有較強(qiáng)的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)性
操作簡(jiǎn)單，2~3個(gè)小時(shí)即可得到結(jié)果，樣品處理量大

豬流感病毒H1亞型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書
【獸用名稱】
通用名：豬流感病毒H1亞型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒
商品名：無(wú)
英文名：H1 Subtype Swine Influenza Virus Antibody Test Kit
漢語(yǔ)拼音： Zhuliuganbingdu H1Yaxing ELISA kangtijiance Shijihe
【主要成分與含量】
1  抗原包被板                           2塊                    （96孔/塊）
2  陰性對(duì)照血清 （藍(lán)色蓋子）            1管                    （1ml/管）
3  陽(yáng)性對(duì)照血清 （紅色蓋子）            1管                    （1ml/管）
4  羊抗豬酶標(biāo)二抗（藍(lán)色蓋子）           1瓶                    （20ml/瓶）
5  20倍濃縮洗滌液（白色蓋子）           1瓶                    （30ml/瓶）
6  底物液A  （紅色蓋子）               1瓶                    （10ml/瓶）
7  底物液B（黑色蓋子）                 1瓶                    （10ml/瓶）
8  終止液  （藍(lán)色蓋子）                 1瓶                    （10ml/瓶）
9  樣品稀釋液  （黃色蓋子）             1瓶                    （50ml/瓶）
10 血清稀釋板                           2塊                    （96孔/板）
11 說(shuō)明書                               1張

取動(dòng)物全血，按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無(wú)溶血。
【洗滌液配制】
使用前，濃縮的洗滌液應(yīng)恢復(fù)至室溫（20～25℃）,并搖動(dòng)使沉淀的鹽溶解（在37℃水浴5~10分鐘），然后用蒸餾水作20倍稀釋（例如：每?jī)蓧K板用50ml的20倍濃縮洗滌液加上950ml水），稀釋好的洗滌液在2～8℃可以存放7天。
【樣品和對(duì)照稀釋】
樣品稀釋：在血清稀釋板中按1:40的體積稀釋待檢血清樣品（例如：195μl樣品稀釋液中加5μl待檢血清樣品）。
對(duì)照稀釋：陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照不用稀釋。
【注意事項(xiàng)】
1  試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至室溫，使用后放回2~8℃。
2  不同批號(hào)試劑盒的試劑組分不得混用，使用試劑時(shí)應(yīng)防止試劑污染。
3  不要用口移液。
4  底物液B不要暴露于強(qiáng)光，避免接觸氧化劑。 
5  未使用的抗原包被板切記不要撕開上面的封口膜。
6  待檢血清樣品數(shù)量較多時(shí)，應(yīng)先使用血清稀釋板稀釋完所有要檢測(cè)血清，再將稀釋好的血清轉(zhuǎn)移到檢測(cè)板，使反應(yīng)時(shí)間一致。
7  濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶加熱使其溶解后再使用。
8  嚴(yán)格按照操作說(shuō)明書可以獲得的結(jié)果。

用于檢測(cè)豬流感病毒H1亞型HA蛋白的抗體，適用于豬流感病毒H1亞型的流行病學(xué)調(diào)查、臨床診斷及免疫抗體水平的監(jiān)測(cè)。
【使用方法】
1  取抗原包被板（根據(jù)樣品多少，可拆開分次使用），每孔加入稀釋好的洗滌液200μl，靜置3分鐘倒掉液體，并在吸水紙上拍干。再分別將稀釋好的待檢血清和 對(duì)照各取100μl加入到抗原包被板孔中，待檢樣品做1孔，陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照各設(shè)2孔，每孔100μl。輕輕振勻孔中樣品（勿溢出），置37℃溫育30 分鐘。
2  甩掉板孔中的溶液，每孔加入稀釋好的洗滌液200μl，靜置3分鐘倒掉，再在吸水紙上拍干，共計(jì)洗滌5次，
3  每孔加羊抗豬酶標(biāo)二抗100μl，置37℃溫育30分鐘。
4  洗滌5次, 方法同2。切記每次在干凈吸水紙上拍干。
5  每孔先加底物液A一滴（50?l）、再加底物液B一滴（50?l），混勻，室溫（18℃~25℃）避光顯色10分鐘。
6  每孔加終止液一滴（50μl），10分鐘內(nèi)測(cè)定結(jié)果（測(cè)定前在震蕩器上輕輕震動(dòng)一下）。
【結(jié)果判定】  以空白對(duì)照孔調(diào)零，在酶標(biāo)儀上測(cè)各孔OD630nm值。
試驗(yàn)成立的條件是兩個(gè)陽(yáng)性對(duì)照孔的OD630nm值相差應(yīng)＜0.3，陽(yáng)性對(duì)照孔OD630nm值均應(yīng)≥0.8，且＜2.0；陰性對(duì)照孔OD630nm值均應(yīng)＜0.2。
根據(jù)公式，S：樣品測(cè)定孔OD630nm值；P：陽(yáng)性對(duì)照孔平均OD630nm值
如果S≥P×0.25，判為陽(yáng)性，S＜P×0.25判為陰性。
【貯存與有效期】2～8℃保存，有效期10個(gè)月。
【規(guī)格】192孔/盒。

豬流感病毒H1亞型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒

【樣品制備】

豬流感病毒H1亞型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒

【作用與用途】